2ª PRÁCTICA
PRÁCTICA Nº 2: "ANÁLISIS DE ORINA"
Fecha: 07/10/19
OBJETIVOS
Con esta práctica vamos a conocer el procedimiento de una determinación de orina empleando reactivos de química seca, como son las tiras reactivas, y a aprender a interpretar los parámetros resultantes a través del lector de tiras de cada una de las dos muestras de orina.
FUNDAMENTOS
Los principios de un análisis de orina con tiras reactivas son:
Además, elimina la subjetividad de la interpretación visual de los colores de reacción de la tira. Las completas opciones ofrecidas por la interfase y las impresiones optimizadas minimizan el riesgo que acompaña a las transcripciones manuales.
Se ha desarrollado para la evaluación instrumental de tiras reactivas para orina.
El instrumento realiza detecciones semicuantitativas de 10 parámetros: sangre, urobilinógeno, bilirrubina, proteína, nitrito, cetonas, glucosa, pH, gravedad específica y leucocitos. En él, los resultados patológicos aparecen claramente destacados con un asterisco, permitiendo así decisiones diagnósticas inmediatas.
MATERIALES
REACTIVOS
Son la base del análisis de orina y tienen un uso muy extendido en el autocontrol del diabético.
Pueden utilizarse para el diagnóstico rápido en consulta o a la cabecera del paciente.
Composición: Es una lámina opaca semirrígida que soporta la capa reactiva (matriz sólida impregnada en reactivos desecados) y las otras capas.
Generalidades de los reactivos de química seca:
Son "unidades de reacción" que poseen, en forma deshidratada, todos los componentes necesarios para la determinación de un analito. La adición de la muestra aporta tanto el analito como el solvente necesario para iniciar la reacción.
Las muestras (suero, plasma, sangre total, orina, etc.) se aplica sobre la superficie del reactivo en fase sólida para que difunda hasta su interior, donde disolverá los componentes de reacción que contiene; una vez disueltos los reactivos, se produce la reacción con el analito, que se cuantificará por reflectometría.
Composición
Capas "obligatorias":
PROCEDIMIENTO
La muestra de orina adulterada con glucosa y albúmina es la que da positivo en proteínas con 100 mg/dL.
OBSERVACIONES
- El rendimiento de las tiras reactivas debe confirmarse mediante el uso de soluciones de control positivas y negativas. Los controles positivos y negativos deben analizarse una vez al día, cada vez que se abra un nuevo frasco de tiras, cada vez que se empiece un nuevo lote de tiras, y cada 30 días para comprobar las condiciones de almacenamiento.
- El análisis de ambas muestras siguen el mismo procedimiento.
Fecha: 07/10/19
OBJETIVOS
- En esta práctica vamos a realizar dos lecturas semicuantitativas de dos tipos de orina patológicas: una de ellas adulterada con glucosa y albúmina.
Con esta práctica vamos a conocer el procedimiento de una determinación de orina empleando reactivos de química seca, como son las tiras reactivas, y a aprender a interpretar los parámetros resultantes a través del lector de tiras de cada una de las dos muestras de orina.
FUNDAMENTOS
Los principios de un análisis de orina con tiras reactivas son:
- Es una prueba de pesquisaje.
- Proporciona información rápida y confiable sobre alteraciones patológicas de la orina.
- Es el primer paso para buscar el diagnóstico de múltiples cambios patológicos a partir del resultado obtenido con el uso de la tira.
- Además, podemos hacer un seguimiento de: enfermedades del tracto renal y urinario, del metabolismo de hidratos de carbono, enfermedades del hígado y procesos hemolíticos, ... por detección de leucocitos, pH, proteínas, sangre, densidad, glucosa, cetonas, urobilinógeno, bilirrubina.
- Lector de tiras: Uryxxon Relax de Macherey Nagel.
Además, elimina la subjetividad de la interpretación visual de los colores de reacción de la tira. Las completas opciones ofrecidas por la interfase y las impresiones optimizadas minimizan el riesgo que acompaña a las transcripciones manuales.
Se ha desarrollado para la evaluación instrumental de tiras reactivas para orina.
El instrumento realiza detecciones semicuantitativas de 10 parámetros: sangre, urobilinógeno, bilirrubina, proteína, nitrito, cetonas, glucosa, pH, gravedad específica y leucocitos. En él, los resultados patológicos aparecen claramente destacados con un asterisco, permitiendo así decisiones diagnósticas inmediatas.
MATERIALES
- Las 2 muestras de orina patológicas recogidas en tubos de orina.
- Papel de filtro para quitarles posteriormente el exceso de humedad.
REACTIVOS
- Tiras reactivas.
Son la base del análisis de orina y tienen un uso muy extendido en el autocontrol del diabético.
Pueden utilizarse para el diagnóstico rápido en consulta o a la cabecera del paciente.
Composición: Es una lámina opaca semirrígida que soporta la capa reactiva (matriz sólida impregnada en reactivos desecados) y las otras capas.
Generalidades de los reactivos de química seca:
Son "unidades de reacción" que poseen, en forma deshidratada, todos los componentes necesarios para la determinación de un analito. La adición de la muestra aporta tanto el analito como el solvente necesario para iniciar la reacción.
Las muestras (suero, plasma, sangre total, orina, etc.) se aplica sobre la superficie del reactivo en fase sólida para que difunda hasta su interior, donde disolverá los componentes de reacción que contiene; una vez disueltos los reactivos, se produce la reacción con el analito, que se cuantificará por reflectometría.
Composición
Capas "obligatorias":
- Soporte: lámina o carcasa sobre la que se construye el reactivo. Puede ser opaca (tiras reactivas) o transparente (slides o películas multicapa).
- Reactiva: contiene (en forma deshidratada) los reactivos necesarios para la cuantificación del analito. Puede ser simple o múltiple, dependiendo de que algunos de estos reactivos sean incompatibles o de que el proceso reactivo precise realizarse en varias fases.
- Reflectante: se fabrica con materiales del tipo del óxido de titanio, sulfato bárico u óxido de magnesio. Su característica principal debe ser que su absorbancia a la longitud de onda de trabajo sea nula para así asegurar una alta sensibilidad de lectura. Esta capa puede estar integrada en otras.
- Difusora: tiene como función hacer que la muestra difunda rápidamente y ocupe toda la superficie del reactivo seco. Con ello se consigue una distribución uniforme de volumen de muestra por unidad de volumen de reactivo.
- Indicadora: su función es alojar el producto final de la reacción, por lo que será en ella donde se produzca la absorción/dispersión de la luz.
- Separadora de plasma: sólo se utiliza en reactivos secos preparados para trabajar con muestras de sangre total. Su función es retener las células sanguíneas y permitir el paso del plasma hacia el interior del reactivo. Suele estar fabricada en fibra de vidrio.
PROCEDIMIENTO
- Sumergir la tira reactiva en el bote de orina asegurándonos de que cubre todas las almohadillas de la tira.
- Eliminar el exceso de muestra dando unos golpecitos de forma suave por el lateral de la tira sobre el papel de filtro para evitar que entre en el instrumento.
- Colocar la tira reactiva en el soporte para las tiras. Las almohadillas reactivas deben mirar hacia arriba. Después del posicionamiento de la tira, la medición se inicia automáticamente, sin necesidad de otra acción. De esta forma, el manejo del instrumento es fácil e higiénico.
- Esperar 1 minuto para que el lector procese los resultados.
- Una vez terminada la interpretación de resultados, desechar la tira reactiva y limpiar con un papel el soporte para tiras del lector.
| Muestra de orina Nº1 | |
| Sangre (BLD) | NEG |
| Urobilinógeno (UBG) | NORM |
| *Bilirrubina (BIL) | 1 mg/dL |
| *Proteína (PRO) | 100 mg/dL |
| Nitrito (NIT) | NEG |
| Cetonas (KET) | NEG |
| Glucosa (GLU) | NORM |
| pH | 5 |
| Gravedad específica (SG) | 1.020 |
| Leucocitos (LEU) | NEG |
| Muestra de orina Nº2 | |
| Sangre (BLD) | NEG |
| *Urobilinógeno (UBG) | 2 mg/dL |
| *Bilirrubina (BIL) | 2 mg/dL |
| *Proteína (PRO) | 30 mg/dL |
| Nitrito (NIT) | NEG |
| Cetonas (KET) | NEG |
| Glucosa (GLU) | NORM |
| pH | 5 |
| Gravedad específica (SG) | 1.015 |
| Leucocitos (LEU) | NEG |
La muestra de orina adulterada con glucosa y albúmina es la que da positivo en proteínas con 100 mg/dL.
OBSERVACIONES
- El rendimiento de las tiras reactivas debe confirmarse mediante el uso de soluciones de control positivas y negativas. Los controles positivos y negativos deben analizarse una vez al día, cada vez que se abra un nuevo frasco de tiras, cada vez que se empiece un nuevo lote de tiras, y cada 30 días para comprobar las condiciones de almacenamiento.
- El análisis de ambas muestras siguen el mismo procedimiento.
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